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生物素?;?6-氨基己酸,Biotin-LC的合成方法

時(shí)間:2025-07-14 16:32:08       瀏覽:5
產(chǎn)品名稱(chēng):生物素?;?6-氨基己酸,Biotin-LC的合成方法
合成方法
1 合成步驟
生物素活化:
試劑:生物素、6-氨基己酸、EDC(1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺)、NHS(N-羥基琥珀酰亞胺)。
反應(yīng):在MES緩沖液(pH 5.0)中,EDC/NHS活化生物素的羧基,與6-氨基己酸的氨基反應(yīng)形成酰胺鍵。
條件:室溫反應(yīng)4小時(shí),避光攪拌。
純化:
方法:通過(guò)高效液相色譜(HPLC)或透析(MWCO 1 kDa)去除未反應(yīng)試劑和副產(chǎn)物。
純度:目標(biāo)產(chǎn)物純度≥95%(HPLC驗(yàn)證)。
表征:
質(zhì)譜(MS):確認(rèn)分子量(理論值357.47,實(shí)際值±0.5)。
核磁共振(1H NMR):驗(yàn)證生物素和6-氨基己酸的特征峰(如生物素的硫代咪唑環(huán)質(zhì)子、氨基己酸的亞甲基信號(hào))。
2 典型反應(yīng)示例
蛋白質(zhì)標(biāo)記:
步驟:將Biotin-LC(5 mM)與蛋白質(zhì)(1 mg/mL)在MES緩沖液(pH 5.0)中混合,加入EDC(10 mM),室溫反應(yīng)2小時(shí)。
純化:通過(guò)透析或脫鹽柱去除未結(jié)合的Biotin-LC。
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