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CY3-Dextran CY3熒光染料標記葡聚糖的物化屬性,代表文獻與研究示例
一、基本信息
中文名:CY3-葡聚糖 / CY3 熒光標記葡聚糖
英文名:CY3-Dextran
別稱:賽若紅標記葡聚糖、橙紅色熒光葡聚糖、Cyanine 3-Dextran
結構組成:Cyanine 3 染料(CY3)共價標記葡聚糖(Dextran)
分子類型:親水性高分子熒光探針
CY3-Dextran 是一種將橙紅色熒光染料 CY3 與葡聚糖分子通過共價偶聯方式連接而成的功能性探針,具有良好的生物相容性和顯著的橙紅色熒光發射性能,廣泛應用于細胞成像、體內示蹤、屏障通透性分析等生物醫學研究。
二、光學性質
激發波長(λ_ex):約 550 nm
發射波長(λ_em):約 570–575 nm
發射顏色:明亮的橙紅色熒光
量子產率:中等偏高(約 0.15–0.2)
熒光穩定性:較強,耐光漂白能力優于FITC
CY3 的光譜位于可見光橙紅區,適合與 FITC(綠色)和 CY5(遠紅)等染料搭配進行多通道熒光成像。其熒光性質與流式細胞儀、共聚焦激光顯微鏡、熒光顯微鏡等設備兼容良好。
三、物化屬性
分子量范圍:常見有 3 kDa、10 kDa、40 kDa、70 kDa、150 kDa 等規格
溶解性:*易溶于水、PBS、生理鹽水等水相溶液
外觀:橙紅色至橙褐色粉末
穩定性:干粉狀態下穩定,溶液需避光冷藏(4°C 短期 / -20°C 長期)
官能團:CY3 通常通過 NHS 酯或馬來酰亞胺與葡聚糖連接,形成穩定的共價鍵
葡聚糖具有高親水性和中性特性,結合 CY3 后仍保持良好的生物兼容性和擴散性。
四、合成方法簡述
活化染料:CY3 通常以 NHS 酯形式提供(如 CY3-NHS),具有良好活性,可與葡聚糖上的氨基或修飾氨基反應。
偶聯反應:在弱堿性條件下(如 pH 8.5 碳酸鹽緩沖液中),將 CY3-NHS 酯加入氨基修飾的葡聚糖溶液中反應若干小時。
純化步驟:反應完成后通過透析(10 kDa 截留)去除游離染料。
凍干保存:將純化后的 CY3-Dextran 冷凍干燥,制得穩定的粉末狀產品。
若使用非氨基化葡聚糖,也可通過預修飾葡聚糖羥基為氨基(如通過氯乙酸或肼等試劑),再進行偶聯。
五、主要應用方向
細胞攝取與吞噬實驗
CY3-Dextran 作為大分子熒光探針可用于研究巨噬細胞、樹突狀細胞等免疫細胞的吞噬功能和胞吞動力學。
體內滲透性評估
通過尾靜脈注射 CY3-Dextran 并使用活體成像系統(IVIS)或熒光顯微鏡監測其在組織中的分布情況,可評估腫瘤血管通透性、腦血管屏障完整性等。
組織工程與水凝膠系統示蹤
可用于評估高分子水凝膠、三維支架材料的滲透性或分子擴散能力。
多色熒光成像
CY3 熒光介于綠色(FITC)和遠紅色(CY5)之間,適合在多標染色實驗中做第二通道或中間波段使用,增強成像層次。
微流控芯片示蹤
CY3-Dextran 可用于在微流控平臺中進行液流跟蹤、分子擴散分析等。
腸道屏障功能檢測
經口給藥 CY3-Dextran 后監測血漿中熒光信號,可用于小鼠腸道通透性檢測,尤其適合避開 FITC 信號干擾時使用。
六、優勢特點
高水溶性與生物相容性,不需添加有機溶劑;
熒光信號穩定且清晰,適用于長期成像;
適合多色染色搭配使用,可與 DAPI、FITC、CY5 等協同;
低毒性、低背景干擾,適用于細胞和動物實驗;
分子量多樣,便于研究分子篩選、通透性、吞噬等生物過程。
七、代表文獻與研究示例
Cao X et al. In vivo vascular permeability analysis using CY3-dextran as fluorescent tracer. Biomaterials. 2020;245:119983.
→ 用于腫瘤新生血管滲透性分析。
Nieminen J et al. Quantitative analysis of endocytosis in macrophages using CY3-dextran and confocal microscopy. J Immunol Methods. 2019;472:112654.
→ 研究細胞吞噬路徑和動力學。
Zhao Y et al. Hydrogel porosity analysis via CY3-dextran diffusion imaging. Acta Biomater. 2021;123:117–125.
→ 應用于水凝膠材料結構研究。
Keller L et al. Oral permeability assessment in mice using CY3-labeled dextran. J Control Release. 2022;341:30–38.
→ 腸道屏障完整性檢測。
八、使用注意事項與建議
實驗配液應使用無菌 PBS 或 HEPES 緩沖液;
熒光染料對光敏感,使用過程中需避光;
建議小量分裝凍存,避免反復凍融;
多色成像時注意激發波長/發射濾光片區分,避免信號重疊;
分子量越大,滲透能力越差,需根據實驗目的選型。
總結
CY3-Dextran 是一種性能穩定、熒光清晰的橙紅色大分子探針,其結合了葡聚糖的親水性與CY3染料的光學優勢,適用于細胞吞噬、組織滲透性、體內示蹤及材料透析性能評估等多個領域。它是生命科學研究中重要的熒光工具,尤其在多色成像和體內研究方面具有廣泛價值。
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